N-Этилмалеимид (НЭМ) — производное малеиновой кислоты. Он содержит имидную функциональную группу и представляет собой активированный алкен, который реагирует с тиолами и часто используется для модификации остатков цистеина в белках и пептидах.
| N-Этилмалеимид | |
|---|---|
| Общие | |
| Систематическое наименование |
1-Этилпиррол-2,5-дион |
| Сокращения | НЭМ |
| Традиционные названия | Этилмалеимид |
| Хим. формула | C6H7NO2 |
| Физические свойства | |
| Молярная масса | 125,12528 г/моль |
| Термические свойства | Температура |
| • плавления | 43-46 °C |
| • кипения | 210 °C |
| Классификация | |
| Рег. номер CAS | 128-53-0 |
| PubChem | 4362 |
| Рег. номер EINECS | 204-892-4 |
| SMILES |
O=C1C=C/C(=O)N1CC
|
| InChI |
1/C6H7NO2/c1-2-7-5(8)3-4-6(7)9/h3-4H,2H2,1H3
HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N
|
| ChEBI | 44485 |
| ChemSpider | 4209 |
Химические свойства
N-Этилмалеимид является акцептором Михаэля. Это означает, что он может присоединять нуклеофилы, такие как тиолы. Образовавшийся в результате такой реакции тиоэфир обладает очень прочной C–S-связью, и реакция является практически необратимой. Реакция протекает при рН 6,5—7,5. N-этилмалеимид может реагировать с аминами или подвергаться гидролизу при более щелочных рН. N-этилмалеимид широко использовался для определения функциональной роли тиольных групп в энзимологии. Он является необратимым ингибитором всех цистеиновых пептидаз, поскольку осуществляет алкилирование тиольных групп в активном центре .
Механизм необратимого ингибирования цистеиновых пептидазы.
Тематические исследования
НЭМ блокирует везикулярный транспорт. Лизисные буферы с 20—25 мМ N-этилмалеимида используются для ингибирования де-сумоилирования белков во время вестерн-блоттинга. НЭМ также используется в качестве ингибитора деубиквитинилирования.
Артур Корнберг и его коллеги использовали N-этилмалеимид, чтобы выключить ДНК-полимеразу III и сравнить её активность с ДНК-полимеразой I. Корнберг был удостоен Нобелевской премии за открытие ДНК-полимеразы I, которая в то время считалась главной полимеразой бактериальной репликации, хотя позже его сын Томас показал, что основной репликативной полимеразой у бактерий является ещё не открытая в то время ДНК-полимераза III.
N-Этилмалеимид активирует оуабаин-нечувствительное хлор-зависимое поступление ионов калия в красные кровяные тельца овец и коз. Шестнадцать лет спустя это открытие способствовало открытию K+/Cl— котранспортёров в клетках человеческих эмбрионов, в которые ввели кДНК изоформы по KCC1. С тех пор N-этилмалеимид широко используется в качестве диагностического инструмента для определения наличия K+/Cl— симпортов в клетках разных видов животных.
