3, 3′-Диаминобензидин — органическое соединение, производное бензидина. Водорастворимый тетрагидрохлорид диаминобензидина используют при иммуногистохимическом окрашивании нуклеиновых кислот и белков. DAB является субстратом пероксидазы хрена.
| 3,3′-диаминобензидин | |
|---|---|
| Общие | |
| Систематическое наименование |
3,3′,4,4′-тетраамино-дифенил |
| Сокращения | DAB |
| Хим. формула | C12H14N4 C12H18Cl4N4 (4HCl) |
| Физические свойства | |
| Молярная масса | 214,27 г/моль 360,11 г/моль (4HCl) г/моль |
| Термические свойства | Температура |
| • плавления | 175–177 °C 280 °C (4HCl.2H2O) |
| Классификация | |
| Рег. номер CAS | 91-95-2 |
| PubChem | 7071 |
| Рег. номер EINECS | 202-110-6 |
| SMILES |
C1=CC(=C(C=C1C2=CC(=C(C=C2)N)N)N)N
|
| InChI |
1S/C12H14N4/c13-9-3-1-7(5-11(9)15)8-2-4-10(14)12(16)6-8/h1-6H,13-16H2
HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N
|
| RTECS | DV8750000 DV8753000 (4HCl) |
| ChEBI | 90994 |
| ChemSpider | 6804 |
| Безопасность | |
| ЛД50 | мышь, орально, 1834 мг/кг |
| NFPA 704 |
|
Синтез
Коммерчески доступные препараты диаминобензидина синтезируют из 3,3′-дихлоробензидина и аммиака в присутствии медного катализатора, при высокой температуре и давлении, с обработкой кислотой.
Альтернативный путь сиснтеза осуществляется через диацетилирование бензидина уксусным ангидридом в основной среде.
- (NH2)C6H4C6H4(NH2) + 2(CH3CO)2O ⟶ (NHCOCH3)C6H4C6H4(NHCOCH3) + 2CH3CO2H
Затем диацетат нитруют азотной кислотой до орто-динитропроизводного.
- (NHCOCH3)C6H4C6H4(NHCOCH3) + 2HNO3 ⟶ (O2N)(NHCOCH3)C6H3C6H3(NHCOCH3)(NO2) + 2H2O
Полученный продукт омыляют.
- (O2N)(NHCOCH3)C6H3C6H3(NHCOCH3)(NO2) + 2NaOH ⟶ (O2N)(NH2)C6H3C6H3(NH2)(NO2) + 2(NaOCOCH3)
Динитробензидин восстанавливают железом в соляной кислоте.
- 3(O2N)(NH2)C6H3C6H3(NH2)(NO2) + 12HCl + 10Fe0 ⟶ 3(NH2)2C6H3C6H3(NH2)2 + 4Fe2O3 + 6FeCl2
Восстановление также может быть проведено хлоридом олова(II) вместо железа или дитионитом натрия в метаноле.
Применение
Диаминобензидин окисляется пероксидом водорода в присутствии гемоглобина, с образованием продукта коричневого цвета. Данную особенность используют для идентификации отпечатков пальцев в крови.
В нейробиологии реакцию окисления DAB пероксидом водорода используют для окрашивания нейронов. В нейроны вводят биоцитин с авидином или стрептавидином, биотин и пероксидазу.
